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IV高特异性荧光探针可用于活性检测的目标酶功能成像

更新时间  2021-08-05 00:09 阅读
本文摘要:近日,中国科学院沈阳化学物理研究所药用资源研发研究组葛广波、杨凌团队研发了一种全新的二肽基肽酶-IV(DPP-IV,CD26)低特异性荧光探针,并将其用作人血及的组织中DPP-IV的活性检测以及活细胞和的组织层面的目标酶功能光学研究,涉及研究成果公开发表在BiosensorsandBioelectronics上。

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近日,中国科学院沈阳化学物理研究所药用资源研发研究组葛广波、杨凌团队研发了一种全新的二肽基肽酶-IV(DPP-IV,CD26)低特异性荧光探针,并将其用作人血及的组织中DPP-IV的活性检测以及活细胞和的组织层面的目标酶功能光学研究,涉及研究成果公开发表在BiosensorsandBioelectronics上。  DPP-IV是哺乳动物体内产于的一种最重要的丝氨酸水解酶,其参予体内多种生物活性多肽(如肠胆胰岛素、神经肽、胃泌素获释肽、生长激素释放激素等)的水解进而造成其部分或几乎失活。

DPP-IV可较慢水解胰高血糖素样肽-1(GLP-1)进而影响胰高血糖素的制备与黏液,因此其在糖代谢过程中扮演着最重要角色,被指出是2型糖尿病化疗的关键靶点。此外,DPP-IV还参予了机体的免疫调节、细胞脊柱、细胞粘附和细胞细胞死亡等过程,其传达/功能的出现异常与肿瘤等多种疾病的再次发生发展密切相关。

因此,创建限于于简单生物样品中的DPP-IV活性的高效且简单的检测方法对于糖尿病化疗药物的检验及临床个性化用药,以及DPP-IV传达/功能出现异常与疾病的关联性研究等具备最重要意义。  该工作中,研究者基于DPP-IV的酶催化剂特性,设计研发了一种全新的高特异性双光子荧光探针底物GP-BAN,并基于该探针研发了利用微孔板高通量检测简单生物样本中DPP-IV活性的超强灵敏检测方法。该方法具备以下优点:(1)特异性低,可必要用作血样、细胞及的组织等简单生物样品中DPP-IV的检测;(2)操作者非常简单且可实现高通量检测,单位测试成本低;(3)检测灵敏度低(可达皮摩尔级),样品需求量小,如血液样品只需2L;(4)可通过比率法展开目标酶的活性检测,抗干扰能力强劲。

利用该探针不仅可实现活细胞及活的组织中目标酶的精确定位及动态动态检测,还可以血液为酶源积极开展DPP-IV抑制剂的高通量检验与密切相关。上述工作不仅为新药研发及临床DPP-IV抑制剂的个性化用药获取了新的工具,也为先前研发商业化的DPP-IV生化检测试剂盒奠下了工作基础。  上述研究工作获得了国家自然科学基金项目和国家重点基础研究发展计划的反对。


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